什么是HPLC？
指高性能液晶图形y。 输液泵、注射器(自动取样器)、色谱柱烤箱，检测器等构成。 这是一种按成分分离样品的技术，可以确认(定性)什么样的东西、装了多少(定量)，并回收分离出的成分(分选色谱法)的正平方根。
日立Primaide
日立Chromaster
日本战争联盟
水泵
为了用自动取样器注入样品，用色谱柱分离后用检测器进行检测，流动相需要流动的泵。 泵有以下3种泵。
等静压泵
在保持流动相组成一定的状态下使用。 GPC分析时使用的送液泵数量为1台。
低压梯度泵
在送液泵前设置电磁阀等，将多个流动相混合。 由于在送液泵的跟前混合流动相(在混合时没有施加泵的压力的意义上)，低压梯度我叫它泵。 1台送液泵就可以进行梯度。 导入时的初期成本得到控制，因为只有一台送液泵，所以运行成本也得以控制。
高压梯度泵
每混合一个流动相需要送液泵，2液梯度时需要2台泵，4液梯度时需要4台泵。 根据各流动相的浓度比率调整流量，供液后混合。 由于在送液后混合了流动相(在混合时施加了泵的压力的意义上)，高压瞬变我叫它泵。 格兰特的延迟会减少。 因为需要多台泵，所以导入时的成本会变高。
低压梯度
高压瞬变
检测器
检测分离成分的模块。 根据样品的种类区分使用检测器。 例如，如果是有UV吸收的样品，可以用UV-VIS检测器或PDA检测器进行检测。 检测器的种类有以下几种。
UV-VIS探测器
从紫外可见光区域的吸收波长的样品用1波长的吸光度进行检测。 用于检测具有芳香环或双键的有机化合物。
PDA检测器
用多波长吸光度检测具有紫外至可见区域吸收波长的样品。 UV-VIS检测器仅限于设定的1波长(或2波长)的测量，而PDA检测器可以同时测量某一定范围的色谱图，因此可以获取时间、强度、波长的三维数据。 是讨论分析条件时有效的检测器。
RI检测器
检测折射率。 糖、酒精等几乎所有的样品都可以检测出来，但缺点是灵敏度低。 多用于GPC分析。 梯度分析是不可能的等轴测使用分析。
荧光探测器
检测吸收激发波长的光而发出的光(荧光)。 不发荧光的样品可以通过衍生化进行检测。 可以以比UV-VIS检测器高50~200倍左右的灵敏度进行分析。 用于氨基酸、维生素和类固醇等的分析。
NQAD检测器
使流动相软化，使水分凝结在残留的气溶胶传播状态的微粒子上，用激光进行检测。 可以检测非易失性半挥发性物质。 可以进行梯度分析，可以以高灵敏度进行检测。
日立5430二极管阵列探测器
日立5440荧光探测器
HPLC的检测器除了上述以外，质谱计来删除它。 质谱分析是将分子离子化，那个m/z这是一种可以通过测量来测量分子质量的装置。 作为缩写有时会记载为MS，读作MAS，但日本质量分析学会推荐使用mes的称呼。 质谱计中具有代表性的东西有以下几种。
四极质谱仪
分离质量电荷比的离子并分析质量。 由4根棒平行捆扎而成，也称为四极。 对置的杆赋予相同的电位，对相邻的杆赋予相反的电位。 另外，杆中流过直流和高频的交流。 调整4根棒的电压送入离子后，只有一定范围的质量电荷比的离子可以稳定地通过。 像这样四极质谱仪通过只提取特定的离子(SIM)可以高灵敏度地定量。 另外使直流和高频交流电压连续变化扫描分析で质谱也可以获得。
三重四极质谱仪
与四极型质谱仪相比，这是一种可以更高灵敏度定量的质谱仪。 2个四极隔着碰撞室(碰撞池)串联连接而成。三重四极质谱仪是，前驱离子用碰撞细胞破坏产品离子格式-单元格MRM通过获取数据，可以得到更高灵敏度的结果。 因为使用四极作为碰撞室(碰撞池)内的离子导向器，所以被称为三四极。 目前“三重四极"并不是严格表达装置构成的术语，因此作为更广义的术语，也有串联质谱仪的说法。
飞行时间质谱仪
这是一种可以根据离子飞行时间进行定性的质谱仪。 测量离子以一定的高能量在飞行管内加速，到达检测器的时间。 质量数小的快，质量数大的慢到达检测器，通过测量该时间可以得到小数点后4位的精密质量。 使用该精密质量可以推测化合物的结构。 也有通过在前级组合四极，可以进行定量和定性两方面分析的混合质谱仪( Q-Tof系统)。
Xevo TQ Absolute (串联四极质谱仪)
Xevo G3 Q-Tof (飞行时间质谱仪）
关于流动相和固定相
流动相是用于注入样品，在色谱柱中进行成分分离，并将该成分输送到检测器的液体。 主要使用有机溶剂和水。 正相使用氯仿、二氯甲烷、*，反相使用水、甲醇、乙腈等。
另外，固定相指色谱柱，是将样品按成分分离的地方。
色谱柱有很多种，根据样品的极性、pH、官能团的种类来区分使用。 作为代表性的列ODS列( Octa Decyl Silyl Column别名C18列)。反相色谱法在中被用作第一选择的色谱柱。
固定相(柱)
流动相
分离方法
HPLC有各种分离方法。 需要根据样品的特性改变分离方法。 极性高样品时为反相色谱，极性低的样品时为反相色谱顺相色谱法聚合物的分析使用凝胶渗透色谱等。 分别进行说明。
反相色谱法
样品的疏水性是根据的差异来区分的分离方法。 是HPLC中的手法。 固定相中含有聚合物等弱极性的填充剂来修改选定线条的属性。 作为代表性的东西，ODS柱经常被使用。 流动相使用甲醇、乙腈作为溶出力强的溶剂，水作为溶出力弱的溶剂。
顺相色谱法
样品的亲水性是根据的差异来区分的分离方法。 固定相使用硅胶等高极性的填充剂。 流动相中使用氯仿、乙酸乙酯作为溶出力强的溶剂，使用己烷等作为溶出力弱的溶剂。 顺相色谱的流动相中含有的极少量的水等可能会对分析结果产生较大的影响。
凝胶渗透色谱( GPC )
这是Gel Permeation Chromatography的缩写，是确认分子量分布的分离方法，主要用于化学工业领域的聚合物分析等。 流动相使用能很好溶解样品的溶剂。 固定相中有样品分子的大小泊尔使用大小的柱。 GPC分析中基本上没有标准品，所以主要使用聚苯乙烯等作为标准品，用聚苯乙烯换算来数值化分子量。
| 分离模式 | 固定相 | 流动相 | 特征 |
|---|
| 顺相 | 硅胶等 | 六氯甲烷等 | 脂溶性成分的分离 |
| 反相 | ODS(C18 )等 | 水甲醇等 | 常用的手法 |
| GPC | 聚合物等 | THF甲苯等 | 分子量分布测定 |
分离方法的特长
分析结果
用HPLC分析的结果用如下色谱图表示。 纵轴为峰值强度，横轴为横轴保持时间显示。 利用该峰强度和保持时间进行定量及定性。
定量
使用标准品改变浓度进行分析，绘制标准曲线。 分析样品时，根据峰面积值位于标准曲线的哪个位置，可以相对求出浓度。
色谱图
标准曲线
定性
通过比较标准样品中各组分的保留时间和样品色谱图的保留时间进行定性。
HPLC引进领域
HPLC在所有领域都有使用。
制药:在药品的质量管理中，必须使用HPLC进行业务。
食品:用于食品中的成分分析(糖或氨基酸)。
化学工业: GPC用于聚合物等的合成确认。
更新时间：2023-08-24 
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